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　　单细胞测序已成为生物医学领域的要害共性手艺。然而，由于缺乏高效的手段降低“假单细胞率”，主流微流控平台的单通道细胞通量通常在1万细胞以下，空载率抵达90%以上，且本钱高昂，限制了对数百万个细胞或上千例样本的人群行枚举行大规模研究。

　　克日，兴发娱乐（国家生物信息中心）蒋岚研究组基于组合标记手艺蹊径刷新优化主流微流控平台，开发了新型单细胞转录组测序手艺FIPRESCI，使细胞通量比现有手艺提高十倍以上，大幅降低本钱。该效果以“FIPRESCI: droplet microfluidics based combinatorial indexing for massive-scale 5′-end single-cell RNA sequencing”为题在Genome Biology 期刊揭晓。

　　研究团队使用FPERSCI对人和小鼠细胞系混淆物测序，获取了8000多个高质量的细胞，其中99.8%的细胞都能明确泉源，批注FIPERSCI具有很低的假单细胞率。随后，为了验证新手艺对差别组织的兼容度，使用FIPERSCI对小鼠整个E10.5胚胎的细胞举行细胞核测序，在10X Genomics 单通道中获取了凌驾10万细胞核的数据。注释效果显示，细胞类型的因素与已揭晓的参考数据相似。别的，FIPERSCI数据还可用于判断细胞类型和发育阶段特异的调控元件（启动子和增强子）使用偏好，发明了著名基因Rbfox2在抑制性神经元发育历程中使用差别的启动子的动态转变。

　　进一步，研究者使用FIPERSCI对来自差别癌症病人及康健人外周血中的T细胞举行单细胞RNA和TCR双组学测序。数据显示相较于康健人，癌症病人外周血中T细胞在细胞亚群组分、基因表达、TCR克隆等多个层面保存显著差别；谛⊙玖康氖萁，已经足以区分癌症病人和康健人，提醒低本钱的FIPERSCI手艺具备基于免疫细胞信息应用于癌症液体活检及早筛方面的潜力。

　　综上所述，新型单细胞测序手艺突破现有手艺的设计局限，大幅提高了效率并降低了本钱，适用于单细胞转录组和调控元件活性、免疫受体序列等多模态剖析，可有力支持跨器官水平的大规模参考细胞图谱研究、跨时间和空间的器官发育研究等，针对大规模康健人和疾。ɡ绨┲，自身免疫，新冠等）的行列细胞图谱研究，高通量CRISPR基因编辑和药物筛选的单细胞分子表型描绘研究等。

　　上述事情由兴发娱乐（国家生物信息中心）完成，蒋岚研究员为通讯作者。蒋岚研究组博士研究生李芸、黄正和偏向东研究组张昭军副研究员为文章的并列第一作者，博士研究生王弃非孝顺了跨模态展望的深度学习模子，解放军总医院王淑芳和李峰先网络处置惩罚了临床样本。兴发娱乐（国家生物信息中心）偏向东研究员，北京大学肿瘤医院季鑫教授，北京大学国际癌症研究院舒绍坤研究员提供了主要资助。该项事情获得了兴发娱乐先导专项、中科院全球共性挑战专项项目、科技部重点研发妄想、国家自然科学基金委等项目的鼎力大举资助。

　　论文链接

FIPRESCI 实验流程图